RNA提取和DNA提取实验中常见问题及过程中的注意事项：降解：降解问题是RNA制备中常常到的问题。因为在RNA提取过程中，样品储存不当或裂解效率低等情况都会导致降解。对于DNA提取，降解不是一个大问题，因为对于PCR，DNA可以被剪切并且工作正常，如果不希望有...

DNA提取的几种方法介绍，以稀盐酸溶液提取DNA时，加入适量去污剂，如SDS可有助于蛋白质与DNA的分离.在提取过程中为抑制组织中的DNase对DNA的降解作用，在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的烙合剂.通常用.15MNaCL,0.015M柠檬钠，并称S...

试剂盒是用于盛放检测化学成分、药物残留、病毒种类等化学试剂的盒子。它一般在医院、制药企业使用。试剂盒使用示例：试剂盒的产生正是为了使实验人员能够摆脱繁重的试剂配制及优化过程，所以试剂盒中一般配备有相应的使用说明书，用户按照说明书只需少量的优化即可得到满意的结果...

什么是DNA？DNA表示脱氧核糖核酸。它是储存遗传信息的主要核酸类型。DNA提取是研究基因和遗传学的基础，对于生物科学的发展至关重要。1953年头次发现并描述了DNA的结构。将DNA描述为双螺旋结构。脱氧核糖核苷酸是DNA的组成部分。因此，脱氧核糖核苷酸有三个...

探针法qPCR试剂盒特点：细菌（Bacteria）广义的细菌即为原核生物是指一大类细胞核无核膜包裹只存在称作拟核区（nuclearregion)（或拟核）的裸露DNA的原始单细胞生物，包括真细菌（eubacteria）和古生菌（archaea）两大类群。人们通...

逆转录PCR的用途普遍，可用于分析基因的转录产物、检测细胞中RNA病毒的含量、合成cDNA探针、直接克隆特定基因的cDNA序列等。如在临床上RT-PCR可以用于遗传病诊断、病症检测、检测病人标本中的RNA病毒，如HAV、HCR、HIV等。在植物方面RT-PCR...

分离外泌体的方法之超速离心：离心是一种利用不同的离心力根据颗粒成分的密度、大小和形状沉淀颗粒成分的过程。超速离心是一种离心过程，较多使用6×106g离心力，有助于隔离更小的组件，例如，核糖体、蛋白质、病毒、外泌体和其他EV。加速度（g）、旋转半径、样品粘度和沉...

探针法qPCR试剂盒使用方法：稀释标准曲线样品（以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）1.由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在单独的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性的病原本产品不提供活...

DNA提取的几种方法介绍，DNA提取的成功与否取决于样品的质量和实验技术的熟练程度。苯酚抽提法：苯酚作为蛋白变性剂，同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液时，由于蛋白与DNA联结键已断，蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶.蛋白分子溶于酚相，...

DNA试剂盒使用过程中需要注意什么？1、实验过程中穿戴工作服和乳胶手套，建议使用带滤芯的吸头。2、试剂使用前要完全解冻，但应避免反复冻融，建议使用前离心30秒。3、实验请按实验室区操作，试剂配制等步骤请严格按照说明书的要求在冰上操作。4、阳性对照品较适扩增温度...

miRNA的加尾法逆转录和qPCR，miRNA加尾法逆转录：增加miRNA逆转录产物长度较直接的方法就是增加miRNA的长度，即在miRNA的3端后面添加一段序列，然后进行逆转录反应。因此，加尾法是由两个酶共同作用完成的，它们分别是PolyA聚合酶和逆转录酶。...

microRNA富集提取方法及步骤：1.较精确估计滤过物体积，加入0.65倍体积无水乙醇（必须是室温的），涡旋或者吹打充分混匀，不要离心。2.取一套新的microRNA吸附柱MA，将上一步骤混合物(每次小于700μl,多可以分两次加入)加入microRNA吸附...

生物试剂Tetraspanins是常见的外泌体标志物。它们包括CD9、CD63和CD81膜蛋白。Tetraspanins参与外泌体的产生。在抗原呈递细胞中，MHC-II分子的功能通过它们整合到富含四跨膜蛋白CD9的细胞质膜区域中来调节。CD63外泌体蛋白被认为...

miRNA的加尾法逆转录和qPCR，miRNA与mRNA不同，成熟的miRNA的长度只有20nt左右，非常短，通常正向引物就足以覆盖其全长甚至有余，反向引物就无处安放了。那么如何实现miRNA的qPCR扩增呢？解决方案就是在逆转录的时候设法增加逆转录产物长度。...

DNA试剂盒使用方法之DNA纯化：细胞试剂盒的开发和应用促进了细胞生物学领域的发展和进步，有助于解决疾病治好、新药研发等问题。DNA提取后，需要进行DNA纯化。DNA纯化是将DNA从杂质中分离出来的过程。DNA试剂盒中通常包含了DNA纯化所需的试剂和材料，例如...

茎环法逆转录技术具有许多优点。首先，该技术可以在样品数量较少的情况下扩增RNA分子，从而避免了RNA样品的纯化和浓缩操作。其次，茎环法逆转录技术可以特异性地扩增目标RNA分子，避免了随机引物引起的非特异扩增，从而提高了检测的准确性和可靠性。此外，茎环法逆转录技...

miRNA逆转录茎环法：首先需要进行RNA样品制备，可选的方法有：离心柱法抽提（不必去除gDNA）；传统Trizol法抽提（需要去除gDNA）。miRNA正向引物：需要分别设计。是否采用通用引物视情况而定，正向引物与通用反向引物不会形成二聚体时才能用。取200...

骨组织RNA提取之其它骨组织破碎方法：确保离心后液体全部滤过去，膜上没有残留，如有必要，可以加大离心力和离心时间。将基因组DNA清理柱子放在一个干净2ml离心管内（不用RNAsefree或者DEPC处理，一般干净的新离心管即可。也可使用RNA吸附柱配套的新的干...

反转录酶(reversetranscriptase,也可写成逆转录酶)又称为依赖RNA的DNA聚合酶。1970年Temin等在致死RNA病毒中发现了一种特殊的DNA聚合酶，该酶以RNA为模板，以dNTP为底物，tRNA(主要是色氨酸tRNA)为引物，在tRNA...

外泌体的分离方法：目前，有许多可用的外泌体分离方法。比较传统的外泌体分离方法是超速离心，许多人将其视为金标准。其他技术主要基于大小排阻或抗体介导的标记外泌体分离。每种分离方法在纯度、数量、效率和通量方面都不同。超速离心法分离法的缺点是外泌体结构容易发生改变，造...

试剂盒生产流程：包被：1、包被前预吸检查头头是否合格，水流是否一同，不一同者应geng换头头，包被应选用好的头头，每包被一块板，应将头头套紧，并且在包被的过程中要留意检查吸液是否一同，在包被过程中若出现任何小问题，都应将此块板做出记号，以便后期组装入库时筛选。...

外泌体分离方法之尺寸排阻层析法：尺寸排阻层析法也被称为凝胶过滤层析法，这种方法是基于凝胶孔的大小和外泌体的大小，大于凝胶孔径的颗粒被洗脱；反之，小于凝胶孔径的颗粒将被抑制。凝胶过滤层析分离法总体上能获得较高的纯度和产量。建议与超滤相结合，这种方法可提供更少的蛋...

DNA试剂盒使用注意事项：保持清洁：在使用DNA试剂盒的过程中，需要保持实验室的清洁。避免杂质和细菌的污染。同时也需要避免试剂的交叉污染，例如使用新的移液器头、离心管等。注意安全：DNA试剂盒中的试剂和材料可能存在危险性，例如有毒、易燃等。因此需要注意安全，戴...

DNA试剂盒使用过程中需要注意什么？1、实验过程中穿戴工作服和乳胶手套，建议使用带滤芯的吸头。2、试剂使用前要完全解冻，但应避免反复冻融，建议使用前离心30秒。3、实验请按实验室区操作，试剂配制等步骤请严格按照说明书的要求在冰上操作。4、阳性对照品较适扩增温度...

探针法qPCR试剂盒特点：细菌（Bacteria）广义的细菌即为原核生物是指一大类细胞核无核膜包裹只存在称作拟核区（nuclearregion)（或拟核）的裸露DNA的原始单细胞生物，包括真细菌（eubacteria）和古生菌（archaea）两大类群。人们通...

外泌体分离方法之免疫学分离方法：免疫学分离法是利用受位于外泌体膜中的选定蛋白质标记物影响的抗体对外泌体进行标记。这些标记的外泌体可以进一步轻松处理和纯化，例如，使用微芯片或磁珠。磁分离后，外泌体被纯化，磁珠被溶解和去除。通过这种简单快速的方法，就可以获得较高纯...

microRNA富集方法（只提取microRNA，不包含>200nt其它总RNA成份。）1.按照前面标准操作步骤1－5操作，直到得到上清。2.较精确估计上清体积（约600μl），加入等体积70％乙醇（请先检查是否已加入无水乙醇!）（必须是室温的），涡旋或者吹打...

各类型试剂盒的原理：管式试剂流水线式的反应流程大幅提高了检测速度，但是无法像板式试剂一样方便地进行原料包被。于是高通量的试剂引入了包埋有四氧化三铁的微球，即超顺磁性微球。与板式试剂的微孔不同，这些微球表面往往进行了进一步处理，带有不同的活性基团比如羧基、氨基、...

磁珠法DNA提取：磁珠法的原理是在磁珠表面修饰有对核酸有吸附作用的特定活性官能基团，通过不同的裂解液结合液洗涤液在特定的条件下能够与目的物质进行特异性结合，同时利用磁珠自身的磁性，在外磁场的作用下可以方便的实现定向移动与富集，从而达到核酸与杂质分离的目的，进而...

现在都有哪些类型的试剂盒？首先是按检测原理区分，主流的有生化试剂、免疫试剂和分子试剂。首先生化试剂的原理一般是按待测物质的生化性质，与试剂组分发生化学反应（也有如酶催化化学反应的生化反应；但是生化试剂中也包含以抗原-抗体反应为原理的免疫比浊试剂），然后根据生化...