外泌体是直径为30-150nm的小细胞外囊泡。在生理和病理条件下，几乎所有类型的细胞都可以释放外泌体，在细胞通讯和表观遗传调控中发挥重要作用。外泌体天然存在于体液中，包括血液，唾液，尿液和脑脊液等，内部含有其来源细胞的核酸，蛋白等物质，因此基于外泌体的疾病诊断...

外泌体的表征方法之光学方法：目前，光学方法是外泌体表征的主要方法，即动态光散射(DLS)、多角度光散射(MALS)和纳米粒子跟踪分析(NTA)。这些方法允许对尺寸（DLS0.5–200nm；MALS10–500nm；NTA10–1000nm）、尺寸分布和浓度进...

外泌体分离方法之筛分分离法:该技术是通过膜从生物液体中筛分外泌体并通过压力或电泳进行过滤来分离外泌体。筛分分离法的分离时间较短，但分离的外泌体纯度却处于较高的水平。筛分分离法的缺点在于分离的外泌体回收率较低。总之，细胞外泌体提取、外泌体分离在疙瘩等研究领域发挥...

该如何选择高质量、使用方便和廉价物美的试剂盒？干扰物实验：通过试验观察试剂对干扰物影响的耐受程度。通常取一混合标本，从中分出几份，分别加入不同已知量的干扰物，然后测定出不同干扰物浓度下的待测物量，比较其测定结果，从各自的偏差程度即可了解这一干扰在试剂盒测定中的...

血浆DNA与血浆游离DNA提取试剂有较高的提取得率。DNA核酸提取得率的确定，常用的是使用紫外分光光度计的方法。但是，血清、血浆dna样本中游离核酸含量较低，如果直接用紫外法检测，得出的数值并不准确，而且多次测量的结果会变异很大。关于提取得率，Qiagen的研...

外泌体是指包含了复杂RNA和蛋白质的小膜泡(30-150nm)，现今，其特指直径在40-100nm的盘状囊泡。1983年，外泌体头次于绵羊网织红细胞中被发现，1987年Johnstone将其命名为“exosome”。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其...

该如何选择高质量、使用方便和廉价物美的试剂盒？干扰物实验：通过试验观察试剂对干扰物影响的耐受程度。通常取一混合标本，从中分出几份，分别加入不同已知量的干扰物，然后测定出不同干扰物浓度下的待测物量，比较其测定结果，从各自的偏差程度即可了解这一干扰在试剂盒测定中的...

外泌体是直径为30-150nm的小细胞外囊泡。在生理和病理条件下，几乎所有类型的细胞都可以释放外泌体，在细胞通讯和表观遗传调控中发挥重要作用。外泌体天然存在于体液中，包括血液，唾液，尿液和脑脊液等，内部含有其来源细胞的核酸，蛋白等物质，因此基于外泌体的疾病诊断...

探针法qPCR试剂盒具有下列特点：1.即开即用，用户只需要提供样品DNA模板。2.引物和探针经过优化，灵敏性高。3.提供阳性对照，便于区分假阴性样品。4.特异性高，引物是根据细菌高度保守区设计，不会跟其他病原菌DNA发生交叉反应。5.本产品足够50次20μL体...

逆转录酶的合成步骤：1、使用前每个组份轻轻混匀，然后2000rpm离心20s；2、取灭过菌且无核酸酶的0.2ml离心管，依次加入2～5μgRNAnμL；3、65℃保温5min，然后冰浴5min；4、往3步骤中的0.2ml离心管依次加入下列组份：RNase抑制剂...

人体内多种细胞及体液均可分泌外泌体，包括内皮细胞、免疫细胞、血小板、平滑肌细胞等。当其由宿主细胞被分泌到受体细胞中时，外泌体可通过其携带的蛋白质、核酸、脂类等来调节受体细胞的生物学活性。外泌体介导的细胞间通讯主要通过以下三种方式：一是外泌体膜蛋白可以与靶细胞膜...

DNA提取的几种方法介绍，DNA提取的成功与否取决于样品的质量和实验技术的熟练程度。苯酚抽提法：苯酚作为蛋白变性剂，同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液时，由于蛋白与DNA联结键已断，蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶.蛋白分子溶于酚相，...

血浆DNA与血浆游离DNA提取试剂的选择方法：血清血浆的量与DNA提取的核酸量成正比。因而，如果要提高核酸得率，可通过增加血清或血浆的量来实现。一般地，做血浆或血清核酸提取，样本量较好在1ml以上。如果1ml或更大量样本得不到满意的检测结果，则应及时考虑更换提...

外泌体的构成：除了RAB蛋白，外泌体中富含具有外泌体膜交换以及融合作用的膜联蛋白（包括膜联蛋白1、2、4、5、6、7、11等）。外泌体膜上富含参与外泌体运输的四跨膜蛋白家族（CD63,CD81和CD9）、热休克蛋白家族（(HSP60,HSP70,HSPA5,C...

各类型试剂盒的原理：按照分离方法的不同，就可以将试剂再进行一个分类。例如上文的层析试剂、板式试剂和管式试剂。但是不得不说这个分类方法其实非常粗糙，主要是为了讲一讲免疫层析试剂而强行生搬硬造的。我们从简单的板式试剂和管式试剂讲起：板式试剂当中较典型的是ELISA...

血清血浆MicroRNA提取：取出析出液和洗涤液，按以下操作：a)析出液：4.5mL加入25.5mL无水乙醇；9mL加入51mL无水乙醇。b)洗涤液：9mL加入21mL无水乙醇；18mL加入42mL无水乙醇。c)配制好的析出液及洗涤液如出现沉淀，可在37℃溶解...

植物基因组DNA提取试剂盒，操作步骤：取10uIDNA进行0.8%琼脂糖电泳检测提取DNA的完整性和质量。注意事项：选取材料时，尽量选取新鲜组织。植株的幼嫩部位如如芽、幼叶、根尖和幼胚等处细胞分裂旺盛，次生物质较少，较适合提取DNA有些植物如油松针叶，水分含量...

外泌体的构成：外泌体富含胆固醇和鞘磷脂。2007年，Valadi等发现鼠的肥大细胞分泌的exosome可以被人的肥大细胞捕获，并且其携带的mRNA成分可以进入细胞浆中可以被翻译成蛋白质，不只是mRNA，exosomes所转移的microRNA同样具有生物活性，...

外泌体分离方法之基于聚合物的沉淀法：基于聚合物的沉淀技术通常包括将生物流体与含聚合物的沉淀溶液混合、4℃孵育和低速离心。用于基于聚合物的沉淀的较常见聚合物之一是聚乙二醇(PEG)。这种聚合物的沉淀可以对分离的外泌体产生温和影响而且可以产生中性的pH值。由此，出...

血浆DNA与血浆游离DNA提取试剂有较高的提取得率。DNA核酸提取得率的确定，常用的是使用紫外分光光度计的方法。但是，血清、血浆dna样本中游离核酸含量较低，如果直接用紫外法检测，得出的数值并不准确，而且多次测量的结果会变异很大。关于提取得率，Qiagen的研...

DNA提取试剂盒是根据氯化芐法构建的，能够从样本中提取基因组DNA的试剂盒。氯化苄具有能将含有纤维素等的细胞壁中的羟基苄基化，从而破坏细胞壁的特性。本制品利用了氯化苄的这一特性，将植物样品冻结融解后，再使用PipetTip的前面将植物样品在Microtube壁...

通过对外泌体以及外泌体提取相关生物试剂的研究发现：外泌体除了蛋白质，外泌体还含有RNA。外泌体miRNA可用于各种疙瘩的判断。目前有八种miRNA被确定为卵巢病的标志物。此外，据报道，肺腺病者的血清和疙瘩样本中的miRNA会增加。前列腺病的血清中外泌体miRN...

逆转录的端粒复制：逆转录经常与细胞恶性转化有关，艾滋、乙肝等很多疾病也有逆转录过程。所以相关研究可以为很多疾病的研究和防治提供帮助。逆转录酶抑制剂就一直是药物研发热点，例如抗HIV的nevirapine。逆转录酶缺乏校对（3'-5'核酸外切酶）功能，所以容易出...

DNA提取检测：溴乙锭染色：在254nm紫外光下检测，如需回收较好在300nm紫外光下割胶。银染法：Ag+与DNA形成复合物，在甲醛还原下可染成黑褐色，灵敏度高200倍，但不能回收。DNA提取回收：电泳到DEAE－纤维素膜：在所需条带前插入DEAE－纤维素膜，...

反转录酶(reversetranscriptase,也可写成逆转录酶)又称为依赖RNA的DNA聚合酶。1970年Temin等在致死RNA病毒中发现了一种特殊的DNA聚合酶，该酶以RNA为模板，以dNTP为底物，tRNA(主要是色氨酸tRNA)为引物，在tRNA...

差速离心法分离外泌体的实验原理：外泌体是一种小的(40-100nm)细胞外膜囊泡，目前进行外泌体分离的普遍方法是差速离心法。应用差速离心法和粒径分析等是细胞外囊泡(EV)研究的重要步骤。已知细胞会分泌许多膜囊泡，这些囊泡的大小、分子含量及其形成机制各不相同具体...

如何选择DNA提取试剂盒？实验室工作中，经常会需要用到纯化的DNA，这时我们通常需要使用一个商业的DNA提取试剂盒对目的DNA进行分离纯化。市面上有很多类型的提取试剂盒，当使用不太熟悉的样本类型时，选择合适的盒子是尤为关键的，试剂盒组分：目前大多数DNA提取试...

DNA试剂盒使用注意事项：保持清洁：在使用DNA试剂盒的过程中，需要保持实验室的清洁。避免杂质和细菌的污染。同时也需要避免试剂的交叉污染，例如使用新的移液器头、离心管等。注意安全：DNA试剂盒中的试剂和材料可能存在危险性，例如有毒、易燃等。因此需要注意安全，戴...

外泌体衍生物miRNA的重要应用：miRNA是一类主要的小分子、单链、非编码RNA分子，其成熟形式的长度在20到22个核苷酸(NT)之间，在几乎所有生物途径中发挥重要作用，包括细胞生长、增殖、分化、免疫反应，细胞凋亡，代谢和疙瘩发生。外泌体在体液中的主要作用是...

RNA提取和DNA提取实验中常见问题及过程中的注意事项：降解：降解问题是RNA制备中常常到的问题。因为在RNA提取过程中，样品储存不当或裂解效率低等情况都会导致降解。对于DNA提取，降解不是一个大问题，因为对于PCR，DNA可以被剪切并且工作正常，如果不希望有...