逆转录（reversetranscription）是以RNA为模板合成DNA的过程，即RNA指导下的DNA合成。此过程中，核酸合成与转录（DNA到RNA）过程与遗传信息的流动方向（RNA到DNA）相反，故称为逆转录。逆转录与反转录严格意义上来说没有什么区别，但...

RNA提取是一种常用的实验技术，用于从生物样本中分离和纯化RNA分子。这项技术的主要目的是研究RNA的结构、功能和表达水平，以及揭示生物体内基因表达的调控机制。通过RNA提取，科学家们能够深入了解细胞和生物体的基因表达模式，从而推动生命科学的发展和进步。首先，...

生物试剂Tetraspanins是常见的外泌体标志物。它们包括CD9、CD63和CD81膜蛋白。Tetraspanins参与外泌体的产生。在抗原呈递细胞中，MHC-II分子的功能通过它们整合到富含四跨膜蛋白CD9的细胞质膜区域中来调节。CD63外泌体蛋白被认为...

探针法qPCR试剂盒特点：细菌（Bacteria）广义的细菌即为原核生物是指一大类细胞核无核膜包裹只存在称作拟核区（nuclearregion)（或拟核）的裸露DNA的原始单细胞生物，包括真细菌（eubacteria）和古生菌（archaea）两大类群。人们通...

外泌体的表征方法之非光学方法：非光学方法主要包括扫描电子显微镜（SEM）、透射电子显微镜（TEM）、冷冻电子显微镜（Cryo-EM）、原子力显微镜（AFM）、免疫检测方法（ELISA）、傅立叶变换红外光谱（FTIR）、可调谐电阻脉冲传感(TRPS)和单粒子干涉...

试剂盒生产流程：1、将包被抗原用包被缓冲液制作包被液，每孔取100mL参加酶标板，盖好盖板膜，包被条件如下表，4℃16-20h包被时酶标板可以叠放，而37℃2h包被时酶标板之间的距离应保持一同（一般为5cm）。依据培养箱的规划调度酶标板间的距离，如培养箱从底部...

microRNA提取方法及步骤：将吸附柱RA放回空收集管中，13,000rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液,以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。取出吸附柱RA，放入一个RNasefree离心管中，根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位加30-50μlRNasefre...

探针法qPCR试剂盒特点：细菌（Bacteria）广义的细菌即为原核生物是指一大类细胞核无核膜包裹只存在称作拟核区（nuclearregion)（或拟核）的裸露DNA的原始单细胞生物，包括真细菌（eubacteria）和古生菌（archaea）两大类群。人们通...

分离外泌体的方法之降水：它是一种基于生物体液中外泌体的电荷沉淀的方法。带负电荷的外泌体可以与PEG35,000Da基质中带正电荷的鱼精蛋白相互作用并形成沉淀。外泌体的回收和重悬比基于超速离心的分离更有效。聚合物沉淀法以更少的劳动力和昂贵的设备分离尿外泌体的潜在...

DNA提取的几种方法介绍，水抽提法：利用核酸溶解于水的性质，将组织细胞破碎后，用低盐溶液除去，然后将沉淀溶于水中，使充分溶解于水中，离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6m.加入2倍体积95%乙醇，立即用搅拌法搅出.然后分别用66%、80%和95...

外泌体（细胞外囊泡）目前被认为是通过生物活性脂质、蛋白质以及RNA来进行细胞之间的通讯，同样外泌体也是目前研究较深入的细胞外囊泡，外泌体的直径只有我们头发直径的百万分之一（30~150nm），当多泡体与细胞膜融合时释放到细胞外的时候，富含许多生物活性分子，如脂...

逆转录酶实验一步法与两步法具有以下区别：一步法比两步法更快速、简便、减少了污染机会、减少了RNA二级结构、减少了PCR反应的错配率；两步法的优势在于中间产物cDNA，便于保存；且第二步PCR只取逆转录反应产物的1/10进行反应，有利于PCR条件的调整，实验重现...

逆转录是指以RNA为模板合成与其互补的cDNA的过程。逆转录PCR是将RNA的逆转录(reversetranscription)和cDNA的聚合酶链式反应(PCR)相结合的技术，故逆转录称为RT-PCR或反转录PCR。逆转录PCR实验原理是，提取组织或细胞中的...

DNA提取试剂盒的保存方式：室温。低温保存可能会有沉淀析出。如果发生析出现象，请于50℃溶解后，再于室温保存。DNA提取试剂盒主要可以分为以下几大类：小量全血基因组DNA提取试剂盒、中量全血基因组DNA提取试剂盒、组织/细胞基因组DNA提取试剂盒、中量/大量组...

试剂盒生产流程：1、将包被抗原用包被缓冲液制作包被液，每孔取100mL参加酶标板，盖好盖板膜，包被条件如下表，4℃16-20h包被时酶标板可以叠放，而37℃2h包被时酶标板之间的距离应保持一同（一般为5cm）。依据培养箱的规划调度酶标板间的距离，如培养箱从底部...

逆转录的发现有重要的理论意义和实践意义。对分子生物学的中心法则进行了修正和补充。经典的中心法则认为：DNA的功能兼有遗传信息的传递和表达，因此，DNA处于生命活动的中心位置。逆转录现象说明：至少在某些生物中，RNA同样兼有遗传信息传递和表达功能。修正后的中心法...

该如何选择高质量、使用方便和廉价物美的试剂盒？试剂盒包装的完整性：应有完整的牢固的包装和详尽明确的说明书。外包装应完整牢固，并清晰印有产品名称、生产批号、失效日期、保存条件及生产单位名称；内包装应有印刷清晰的标签，牢固贴于容器的表面，标签内容包括：品名、批号、...

逆转录（reversetranscription）是以RNA为模板合成DNA的过程，即RNA指导下的DNA合成。此过程中，核酸合成与转录（DNA到RNA）过程与遗传信息的流动方向（RNA到DNA）相反，故称为逆转录。逆转录与反转录严格意义上来说没有什么区别，但...

分离外泌体的方法之超滤：样品通过0.2μm聚醚砜（PES）膜过滤，较大的颗粒物质（如细胞碎片和凋亡体）被滞留出来。然后，包括外泌体在内的半处理滤液样品通过TFF系统通过500kDa截止滤芯进行超滤过程，进料流速为120mL/min，跨膜压力10:1，外泌体太大...

活性蛋白提取试剂盒适用于从各种原代或传代细胞和各种实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等哺乳动物组织中提取蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，...

在RNA提取中，异丙醇用于将RNA分子从酚/氯仿上层水相中沉淀下来。异丙醇通过改变RNA和水之间的相互作用力，使RNA分子凝聚成小颗粒，并沉淀到管底。较后，RNA提取需要使用一种称为乙醇的有机溶剂。乙醇是一种用于洗涤和纯化RNA分子的溶剂。在RNA提取中，乙醇...

RNA逆转录实验注意事项：RNA定量：除了掌握RNA的完整性之外，反转录之前还需要对RNA浓度进行测定。一般反转录试剂盒会对上样量有要求，建议totalRNA上样量小于5μg。超过这个范围，会使反转录产物产生偏好性(表达丰度高的基因优先被反转录)而造成定量结果...

DNA提取试剂盒的保存方式：室温。低温保存可能会有沉淀析出。如果发生析出现象，请于50℃溶解后，再于室温保存。DNA提取试剂盒主要可以分为以下几大类：小量全血基因组DNA提取试剂盒、中量全血基因组DNA提取试剂盒、组织/细胞基因组DNA提取试剂盒、中量/大量组...

外泌体的表征分析：动态光散射：使用Anton-PaarLightsizer500粒子分析仪测定外泌体制剂中的粒度分布。动态光散射测量由于溶液中粒子的布朗运动引起的散射光强度的动态波动，（685nm的激光，检测角度为15、90、175度）；较小的粒子比较大的粒子...

逆转录实验的准备工作：1、实验器具与材料：（1）移液头：200ul、10ul；（2）吸头：200ul、20ul；（3）EP管1。5ml、100ul；（4）水浴箱。2、实验器具的处理与准备，塑料制品：（包括吸头、EP管等）将塑料制品逐个浸泡于1‰DEPC水中（必...

各类型试剂盒的原理：层析试剂，既然讲层析试剂就也要讲板式试剂和管式试剂的区别，这就有点头疼了，我尽量讲得有逻辑一点。首先需要很不严谨地总结一下免疫试剂通用的检测流程：在特定的反应体系中，样本中的目标物质与试剂的功能组分特异性地结合，该反应依照抗原-抗体反应原理...

过柱法DNA提取的优势：离心柱法DNA提取它的优点是比传统的酚氯法提取的纯度高，有利于RNA保护，而且能进行微量操作，以其低廉的价格和相对便捷的操作，渐逐取代了传统DNA提取方法，被高校科研所等市场普遍接受。离心柱法DNA提取的缺点是需要较多的样本，耗材多，对...

外泌体试剂盒原理：传统的外泌体研究，基本都是用WB之类来检测和表征外泌体，比如用SDS-PAGE电泳可分析Exosome中蛋白的大致含量及种类（通过条带的位置和条带的粗细）；Western-Blot可以检测Exosome中某特定蛋白的表达情况，就跟我们检测其他...

逆转录酶是存在于RNA病毒体内的依赖RNA的DNA聚合酶。RT-PCR实验中的逆转录酶需要具有以下二种活性：依赖RNA的DNA聚合酶活性：以RNA为模板合成cDNA的首先条链。依赖DNA的DNA聚合酶活性：以一条DNA链为模板合成互补的双链DNA。在选择逆转录...

DNA提取的几种方法介绍，以稀盐酸溶液提取DNA时，加入适量去污剂，如SDS可有助于蛋白质与DNA的分离.在提取过程中为抑制组织中的DNase对DNA的降解作用，在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的烙合剂.通常用.15MNaCL,0.015M柠檬钠，并称S...