茎环法逆转录是一种逆转录反应的技术，它利用茎环结构的RNA分子作为反向引物，在逆转录过程中特异性地扩增目标RNA分子。该技术在分子生物学和医学研究中得到了普遍的应用，特别是在RNA的研究和检测中具有独特的优势。茎环法逆转录技术的基本原理是利用逆转录酶和茎环结构...

植物基因组DNA提取试剂盒，操作步骤：取10uIDNA进行0.8%琼脂糖电泳检测提取DNA的完整性和质量。注意事项：选取材料时，尽量选取新鲜组织。植株的幼嫩部位如如芽、幼叶、根尖和幼胚等处细胞分裂旺盛，次生物质较少，较适合提取DNA有些植物如油松针叶，水分含量...

目前新型的冠状病毒所用的核酸检测试剂盒，则是利用了PCR的原理，简单来说就是通过DNA双螺旋结构的特点来进行检测，因为DNA双螺旋结构是碱基互补配对的，也就是说我们可以在体外通过病毒的核酸序列做出一条互补链，然后用这个互补链做成试剂盒，如果你的体液里面还有这种...

外泌体试剂盒提供各种人类外泌体抗体标记物(HumanEXOSOMALANTIBYMARKERS)：抗体是科学家在生物医学和诊断研究中必不可少的工具。针对外植体相关抗原的抗体有助于细胞、组织或其他生物样本中外泌体的定性和/或定量。Immunostep有普遍而高质...

RNA逆转录实验注意事项：去除基因组DNA污染：残留的基因组DNA(gDNA)会对荧光定量结果造成很大的干扰，为了使结果更加的真实、可重复，我们需要去除gDNA干扰。我们可以在引物设计时避免gDNA的扩增，比如将上下游引物分别设在不同的外显子上；或者在提取RN...

分离外泌体的方法之降水：它是一种基于生物体液中外泌体的电荷沉淀的方法。带负电荷的外泌体可以与PEG35,000Da基质中带正电荷的鱼精蛋白相互作用并形成沉淀。外泌体的回收和重悬比基于超速离心的分离更有效。聚合物沉淀法以更少的劳动力和昂贵的设备分离尿外泌体的潜在...

血清血浆MicroRNA提取：取出析出液和洗涤液，按以下操作：a)析出液：4.5mL加入25.5mL无水乙醇；9mL加入51mL无水乙醇。b)洗涤液：9mL加入21mL无水乙醇；18mL加入42mL无水乙醇。c)配制好的析出液及洗涤液如出现沉淀，可在37℃溶解...

分离外泌体的方法之密度梯度超速离心：有助于根据尺寸、结构和形态差异分离和分析纳米级材料。DGUC“细化”分离的囊泡，并使用密度为1.07g/mL或更低的密度梯度培养基。水中碘沙醇、冰冷的PBS和蔗糖是用于外泌体分离的常见梯度培养基。有市售的碘沙醇密度梯度分馏膜...

RT-PCR逆转录引物设计原则：1.上下游引物要保守：扩增子长度需选择一段保守片段（100-200bp）进行PCR扩增，选择片段需跨越内含子，因内含子的基因组DNA序列不会被扩增，也可减少从污染的基因组DNA中扩增得到的假阳性风险。引物选取同样需要保守。2.引...

DNA检测试剂盒的原理：细胞核染色质DNA断裂是细胞凋亡的标志特征。在细胞发生凋亡时，核酸内切酶被开启，选择性降解染色质DNA，形成50-300kb的大片段，并进而在核小体连接处断裂，形成180-200bp或其整倍数的DNA的片段，这些DNA的片段可从细胞中提...

核酸提取，是分子生物学中较常见的基本操作，一般分为DNA提取与RNA提取，提取核酸的质量直接影响后续的检测工作，暂对常见的问题进行了一个总结。DNA提取：1.A260/280比值较低？或者A260/280比值较高？用水作为洗脱液比较偏低，或者蛋白质残留，但如果...

骨组织RNA提取之其它骨组织破碎方法：确保离心后液体全部滤过去，膜上没有残留，如有必要，可以加大离心力和离心时间。将基因组DNA清理柱子放在一个干净2ml离心管内（不用RNAsefree或者DEPC处理，一般干净的新离心管即可。也可使用RNA吸附柱配套的新的干...

植物蛋白提取试剂盒在利用液氮充分磨碎植物组织的同时，采用特殊的试剂对植物细胞释放出来的蛋白进行沉淀，并使用蛋白酶抑制剂抑制蛋白酶活性，很大程度地保持所抽提蛋白质的完整性；而且蛋白抽提物呈干粉状，有利于蛋白质的长期保存。植物蛋白提取试剂盒特点：1、提取的蛋白质是...

当外泌体在1983年头次被发现后，其被认为是细胞排泄废物的一种方式，如今随着大量对其生物来源、其物质构成及运输、细胞间信号的传导以及在体液中的分布的研究发现外泌体具有多种多样的功能。外泌体的功能取决于其所来源的细胞类型，其可参与到机体免疫应答、抗原提呈、细胞迁...

外泌体的构成：外泌体富含胆固醇和鞘磷脂。2007年，Valadi等发现鼠的肥大细胞分泌的exosome可以被人的肥大细胞捕获，并且其携带的mRNA成分可以进入细胞浆中可以被翻译成蛋白质，不只是mRNA，exosomes所转移的microRNA同样具有生物活性，...

逆转录过程由逆转录酶催化，此酶也称依赖RNA的DNA聚合酶（RDDP），即以RNA为模板催化DNA链的合成。合成的DNA链称为与RNA互补DNA（complementaryDNA,cDNA）。逆转录酶在生物界存在于逆转录病毒以及真核细胞（如端粒酶）中，拟逆转录...

该如何选择高质量、使用方便和廉价物美的试剂盒？准确度的测定：通常用回收实验来衡量试剂盒的准确度。作回收实验时，回收值不得超出线性范围，回收率一般要求在100%±5%以内。对于一些无法准确加入的待测物（如酶和一些难以得到的标准待测物）也可以用对比实验加以衡量。方...

磁珠法DNA提取的优势：能够实现自动化、高通量操作，配合96孔的核酸自动提取仪，在以往做一个样品的提取时间内可同时实现对96个样品的处理，效率直接提高96倍，满足了当前生物学高通量操作的要求，使得在大规模戴口罩爆发时能够进行快速筛查原因，这个优点是其他方法难以...

什么是DNA提取？DNA提取是DNA的分离和纯化过程。DNA可以从血液、冷冻组织样本或石蜡组织块中分离出来。DNA提取的三个步骤是细胞裂解、DNA分离和沉淀。在细胞裂解过程中，细胞膜和细胞核膜等细胞膜屏障会破裂，从而暴露DNA。下一步是从样品中去除膜脂。较后，...

外泌体DNA提取过程：1、将吸附柱放入收集管内，将700μL上述溶液转入吸附柱内，12,000rpm4℃离心1分钟，弃收集管内废液；将剩余溶液转移至吸附柱内，12,000rpm4℃离心1分钟，弃收集管内废液。2、将吸附柱放回收集管内，加500μL洗涤液A至吸附...

虽然茎环法逆转录技术在分子生物学和医学研究中具有普遍的应用，但在实际应用中还存在一些挑战。例如，茎环结构的RNA分子需要经过复杂的化学合成和纯化过程，从而增加了技术的难度和成本。此外，茎环法逆转录技术也面临着样品污染、PCR反应中的非特异扩增等问题，需要在实验...

DNA提取试剂盒的保存方式：室温。低温保存可能会有沉淀析出。如果发生析出现象，请于50℃溶解后，再于室温保存。DNA提取试剂盒主要可以分为以下几大类：小量全血基因组DNA提取试剂盒、中量全血基因组DNA提取试剂盒、组织/细胞基因组DNA提取试剂盒、中量/大量组...

外泌体衍生物miRNA的重要应用：miRNA的灵敏生物标志物测定法主要用于检测早期阶段(0-1)疙瘩的存在。除了基于组织活检的当前研究外，循环miRNA的研究是生物标志物研究中一个新的扩展领域，因为它们具有所有特征（miRNA分析、诊断、预后、治着反应和预测性...

外泌体分离方法之亲和层析分离法：在亲和层析分离法方面，主要使用凝集素和合成Vn(venceremin)肽。凝集素将结合存在于外泌体表面的糖基化蛋白质，从而使外泌体沉淀。Vn肽分离技术基于其对含有HSP的细胞外颗粒的高亲和力。然而，这种方法比较容易使提取物被膜表...

DNA检测试剂盒操作步骤：1、加入130μLPrecipitant和950μL冷乙醇,混匀，置—20℃,1小时以上或过夜；2、4℃，12，000-14，000rpm离心15-30min，小心地弃去上清，收集沉淀的DNA；3、加入0.5mL70%的冷乙醇，洗DN...

什么是RNA提取？RNA提取是指从样品中纯化RNA的过程。RNA提取的常规方法称为硫氰酸胍-苯酚-氯仿提取。Guanidiniumthiocyanate使蛋白质变性。此外，它破坏水分子的氢键并用作离液剂。RNA提取中使用一种特殊试剂，称为三试剂。它含有硫氰酸胍...

外泌体蛋白质特征是:膜结合四跨膜蛋白（CD9、CD63、CD81和CD82），以及常规用于分离的EpCAM和Rab5。其他公认的蛋白质是受体（CD46和CD55）、热休克蛋白（HSP；Hsc70、Hsp70和Hsp90）、参与外泌体形成的蛋白质（Alix、TS...

外泌体分离方法之尺寸排阻层析法：尺寸排阻层析法也被称为凝胶过滤层析法，这种方法是基于凝胶孔的大小和外泌体的大小，大于凝胶孔径的颗粒被洗脱；反之，小于凝胶孔径的颗粒将被抑制。凝胶过滤层析分离法总体上能获得较高的纯度和产量。建议与超滤相结合，这种方法可提供更少的蛋...

该如何选择高质量、使用方便和廉价物美的试剂盒？干扰物实验：通过试验观察试剂对干扰物影响的耐受程度。通常取一混合标本，从中分出几份，分别加入不同已知量的干扰物，然后测定出不同干扰物浓度下的待测物量，比较其测定结果，从各自的偏差程度即可了解这一干扰在试剂盒测定中的...

该如何选择高质量、使用方便和廉价物美的试剂盒？生化诊断试剂盒的质量是保证实验室检测结果准确性的关键因素之一。目前，由于临床生化自动分析仪器的普及应用，商品化的不断涌现。因此，如何选择和评价高质量的、符合实验室分析要求的，以及使用方便和价廉的试剂盒，不只是检验工...